實時熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）也稱 QPCR，是指在DNA 擴增反應中，以熒光化學物質測單次聚合酶鏈式反應（PCR）循環后產物總量的方法。

實時熒光定量PCR儀主要由樣品載臺、基因擴增熱循環組件、微量熒光檢測光學系統、微電路控制系統、計算機及應用軟件組成。其中基因擴增熱循環組件工作原理與傳統基因擴增儀大致相同，不同廠家不同型號的產品分別采用空氣加熱、壓縮機制冷、半導體加熱制冷等工作方式。微量熒光檢測系統由熒光激發光學部件、微量熒光檢測部件、光路、控制系統組成。

常用的熒光激發方式有兩種：鹵鎢燈和LED；熒光檢測元件常用兩種方式：光電倍增管和冷光CCD攝像機，光單色元件有濾光片和光柵。在實時PCR擴增過程中，熒光信號被收集，轉化為成為擴增和熔解曲線。具體數據就是基線，熒光閾值和Ct值。